蛋白質(zhì)的磷酸化和去磷酸化是調(diào)節(jié)涉及基因表達(dá)、細(xì)胞粘附、細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖和分化的蛋白質(zhì)的功能特性的主要信號(hào)機(jī)制之一。蛋白質(zhì)可以被特定絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基上的蛋白激酶磷酸化。在WB中利用檢測磷酸化蛋白抗體已經(jīng)成為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究的常用工具。但是研究者在使用高濃度的抗體或延長曝光時(shí)間的條件下，有時(shí)細(xì)胞裂解物中低水平的內(nèi)源性磷酸化蛋白也經(jīng)常不能被檢測到。目前大多數(shù)市售的WB封閉劑(如脫脂奶粉、血清、BSA)能封閉膜上未反應(yīng)的位點(diǎn)，從而減少分析過程中非特異性抗體結(jié)合的量，但是這些試劑不是設(shè)計(jì)用來在WB中保存磷酸化蛋白抗原的。Cellbiolabs提供一種專門用于磷酸化蛋白WB檢測中封閉試劑，該試劑包含一種zhuan利配方，與傳統(tǒng)封閉試劑相比，

具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn):

1、專為磷酸化蛋白WB檢測設(shè)計(jì)

2、能增強(qiáng)低水平磷酸化蛋白信號(hào)而不增加背景

3、預(yù)混干粉，易于溶解方便使用

 應(yīng)用舉例

圖1.Superior Blocking with PhosphoBLOCKER™ Blocking Reagent. A549 cell lysate was blocked with dry milk (top) or PhosphoBLOCKER™ reagent (bottom) before detection with anti-Phospho-p38 antibody.

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